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SE-i•FISH循环肿瘤细胞CTC检测(常规四色) 收藏

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SE-iFISH循环肿瘤细胞CTC检测+单细胞测序

人体结构的基本单位是细胞。人体大约由100兆个细胞组成(100,000,000,000,000) 。不同的细胞承担着不同的生命活动,由细胞核内DNA统一调控。传统检测手段,需要从大量细胞中获取足够多的DNA进行测序,因此测序结果是这些细胞“整体”的表征。然而,由于细胞异质性,相同表型的细胞的遗传信息可能存在显著性差异,很多低丰度的信息会在整体表征中丢失。单细胞测序首先不是仅仅对一个细胞进行测序,而是说该项技术能对单一细胞的基因组进行测序,可以理解为单细胞水平上的测序。

健为采用SE-iFISH循环肿瘤细胞分离鉴定技术联合SC-NGS单细胞全基因组扩增测序技术对单细胞中与肿瘤发生发展相关的关键50基因热点区域、个体化治疗107基因、全外显子、全基因组及循环肿瘤细胞联合PD-L1进行检测,提供最完整的肿瘤单细胞突变信息 ,为临床科研助力。

1、采用SE-iFISH CTC分离与鉴定技术,对血液中的CTC进行有效鉴定和分离

SE-iFISH CTC分离与鉴定技术采用①差相富集技术(Subtraction Enrichment, SE),有效去除血浆蛋白,抗体组合群有效去除白细胞,非低渗裂解法去除红细胞,非血源性细胞分离介质去除RBC、分离CRC;采用②细胞鉴别技术:iFISH(有效、直观鉴别CTC细胞三要素:核酸、蛋白、细胞形态)。

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5通道双瘤标/6通道三瘤标-iFISH

SE-iFISH CTC分离与鉴定技术特点

    (1)SE-iFISH可以有效区分异倍体CEC与CTC;

    (2)分离鉴定不依赖肿瘤细胞表面标示物的表达;

    (3)分离与鉴定不依赖于肿瘤细胞大小;

    (4)无抗体(anti-EpCAM) 或多肽刺激,完整保持细胞活性;

    (5)无低渗损伤;

    (6)可同时检测细胞生物链三要素,DNA、蛋白质和细胞形态

2、SC-NGS单细胞测序技术

单细胞测序技术即在单细胞水平对全基因组DNA进行非选择性扩增,其目的是在没有序列倾向性的前提下大幅度增加DNA的总量,进而利用序列捕获技术将全基因组DNA捕获并富集进行高通量测序的基因组分析。主要步骤包括:细胞挑取、扩增、文库构建、测序、生物信息学分析。

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单细胞测序流程

3、健为单细胞全基因组扩增技术S-MDA技术特点

       优化的多重置换扩增技术(super multiple displacement amplification, s-MDA)采用高保真酶(phi29 DNA聚合酶和与Bst大片段DNA聚合酶),在指数扩增的基础上,降低扩增错误率,扩增效率更高。能覆盖人类大约90%以上的基因组,全基因组扩增的一致性较好,并能在单个细胞水平上测定拷贝数变异、单核苷酸点变异、插入/缺失等变异。

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多 重 置 换 扩 增 技 术 (super multiple displacement amplification, MDA)

4、单细胞测序的临床应用

    (1)研究肿瘤内部异质性,探索肿瘤克隆的进化关系;

    (2)研究循环肿瘤细胞和转移部位的肿瘤浸润细胞,探索肿瘤转移机制;

    (3)协助对肿瘤进行精确分型;

    (4)检测肿瘤中对药物敏感和不敏感的细胞,研究肿瘤耐药机制;

    (5)探索常规样本检测与单细胞测序检测结果的一致性比对;

    (6)新的驱动基因的发现。

5、SE-i•FISH循环肿瘤细胞CTC检测(常规四色+PD-L1)

无创、动态监测、免疫治疗阳性率高

应用健为SE-iFISH整合技术,同步联合检测PD-L1异倍体CEC、CTC及多重肿瘤标志物蛋白表达,不仅可以筛选适于免疫治疗的肿瘤患者,而且为进一步研究染色体异倍体及其它标志物与免疫治疗疗效的相关性提供了有效的技术平台。

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 PD-L1+CTC示意图

6、样本采集及检测周期:

SE-i•FISH循环肿瘤细胞CTC检测(常规四色)

5个自然日

 

使用ACD采血管

 (BD公司生产)



单细胞扩增

3个自然日

单细胞全基因组扩增测序

13个自然日

单细胞全外显子扩增测序

13个自然日

单细胞50基因测序

10个自然日

单细胞107基因检测服务

10个自然日

细胞挑取

2个自然日

SE-i•FISH循环肿瘤细胞CTC检测(常规四色+PD-L1)

5个自然日